发展更精准高效的诊断技术

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本【běn】报记【jì】者 段梦【mèng】兰【lán】结核【hé】病的检【jiǎn】测【cè】诊断技【jì】术不断发展。随着分【fèn】子【zǐ】生物学突飞猛【měng】进，多种非痰液【yè】诊断技术【shù】、高【gāo】通量测序技术、核酸质谱【pǔ】检测技术等补充了【le】传统细菌学检【jiǎn】测与诊断方法，检测标本也从痰液标本扩展到非痰液【yè】标本。

更加高效、准确【què】的【de】诊断【duàn】技术【shù】，是终止结核病流行【háng】的必要条件之一【yī】。在近【jìn】期召开的2023年全国结【jié】核病学术【shù】大【dà】会【huì】上，众多专家学者就【jiù】结核病检【jiǎn】测、诊断等领域的技术发展与【yǔ】突破进行了交流。

更快找到结核杆菌深呼吸【xī】，低头【tóu】，弯腰，用力【lì】咳嗽……长期以【yǐ】来，留痰获取【qǔ】痰液标本进行检【jiǎn】测是【shì】临【lín】床诊断结核【hé】病的【de】“金标准【zhǔn】”。1882年【nián】，德国科学家罗【luó】伯特·科【kē】赫首次发现并证明了结核分枝杆菌是结核病的病原菌【jun1】。此【cǐ】后，痰涂【tú】片【piàn】镜检技术成为沿用至今的【de】结核病诊【zhěn】断方法【fǎ】。

据了解，目【mù】前【qián】结核病的检【jiǎn】测诊断有细菌学、分子生物学、免疫【yì】学等几【jǐ】条路【lù】径【jìng】，临床上也通过X线检查进【jìn】行影像学诊断。

“传统的【de】细菌学诊断方法【fǎ】包括痰涂【tú】片镜检和【hé】痰结核【hé】菌培【péi】养等【děng】，但临床上看痰涂片敏感度较低，痰结核菌培【péi】养耗时较【jiào】长，严重影响了【le】结核病的早期精准高效诊断。”山东大学附属【shǔ】公【gōng】共卫生临床中心结核科丁彩红副主任医师【shī】说，在【zài】痰液【yè】标本检测中，当患者无【wú】痰或【huò】无法提供高【gāo】质量痰【tán】液时，可能【néng】无法获【huò】取准确的【de】诊断结果【guǒ】。

丁彩红表示，近年来，一批如GeneXpertMTB/RIF等用于结核病早【zǎo】期诊断的快速诊【zhěn】断技【jì】术大大提高了诊断准确性【xìng】，缩短【duǎn】了诊断时间。但在痰液稀少【shǎo】或无【wú】痰结【jié】核患【huàn】者【zhě】中，此类检测技术【shù】的灵敏【mǐn】度也【yě】会【huì】打折扣。

具有高【gāo】灵敏度和特异度【dù】的分子生物学【xué】检【jiǎn】测诊断技【jì】术为患者【zhě】早【zǎo】期诊断及【jí】精【jīng】准治【zhì】疗提【tí】供了依据，目前被迅速推广【guǎng】，属于热门研究领域。首都医科大学附属北京【jīng】胸【xiōng】科医院结核一科【kē】副主【zhǔ】任聂【niè】文娟说【shuō】，将分子生【shēng】物学检测诊断技术【shù】应用于病原学诊断，可【kě】以实现更【gèng】高效、精准的检测。

“比如，通过分子生物学技术检测患者【zhě】的体液【yè】标【biāo】本，找到包括结核分枝杆菌在内的病原微生物【wù】基因【yīn】，以此诊断疾病。”聂文娟介【jiè】绍，传统痰结核菌培【péi】养【yǎng】需要花费近【jìn】1个月时间，而分子生物学技术可以在1天【tiān】内实现诊【zhěn】断【duàn】。这意味【wèi】着【zhe】，找到结核【hé】分枝杆菌变得更【gèng】快、更【gèng】准【zhǔn】。

多条路径指【zhǐ】向共同目标“我们【men】向着【zhe】终结【jié】结【jié】核病【bìng】流行的共同目标努力【lì】。”会【huì】上，众【zhòng】多专家学【xué】者就近期结核病检测、诊断【duàn】技术的探【tàn】索与发现进行了分享。

“我们近期的研究验证了【le】纳【nà】米孔测序技术【shù】用于疑似肺结核患者支气管肺泡灌洗液【yè】样本的诊断【duàn】价【jià】值。”聂文娟介绍，该【gāi】研究对现【xiàn】有分子生物学【xué】技术进行【háng】了优化，运用高【gāo】通量的纳【nà】米孔测【cè】序【xù】技术，实现同【tóng】时检测多种基因【yīn】片段【duàn】，短时间内获取【qǔ】样本【běn】中微【wēi】生物的【de】生物学信息，同【tóng】时检测其基因【yīn】序列是否发【fā】生耐药基因突变。

“我们不仅能够高效【xiào】找【zhǎo】到【dào】结核分枝【zhī】杆菌，还能同步判断【duàn】找到的细菌是‘敏感’还【hái】是‘耐药’，一举多【duō】得【dé】。”聂文娟说。

“在临床中，细菌【jun1】学检测为阴性的肺结核患者占有一定比例，存在一定的【de】误诊和漏诊。”丁彩红及团【tuán】队成员利用【yòng】核酸质【zhì】谱检测技【jì】术对痰液及支气管肺泡灌洗液样本检测发【fā】现【xiàn】，该技术有【yǒu】利于【yú】提高痰液【yè】含菌量较低的肺结【jié】核患者的早期【qī】诊【zhěn】断【duàn】率【lǜ】，可快速检【jiǎn】测结核【hé】分【fèn】枝杆菌，并同【tóng】时检【jiǎn】测是【shì】否存在耐【nài】药情况。

新型高性【xìng】能非【fēi】痰液诊断技术【shù】不断发展【zhǎn】，覆盖【gài】更多无痰或少痰【tán】患者。“基于新兴的CRISPR检测技术【shù】，我们追踪【zōng】了血液标【biāo】本中【zhōng】结核【hé】分枝【zhī】杆菌的无细【xì】胞DNA，为快速诊断结核病并监测药物治疗【liáo】是否有效提供了【le】依据。”深圳【zhèn】国家感染性疾病临【lín】床【chuáng】医学研究中心特聘副研【yán】究员【yuán】黄【huáng】震介绍，该技术【shù】尤其在细菌学检测方法未【wèi】检测【cè】到或细【xì】菌较少的肺结核【hé】病【bìng】例的早期诊【zhěn】断中，具有潜在价【jià】值。

将人工【gōng】智能【néng】运【yùn】用【yòng】到结核病【bìng】诊断领域【yù】也是当【dāng】前【qián】热【rè】点之【zhī】一。“在影像学【xué】诊断【duàn】领域中，医【yī】生读片子耗【hào】时耗力，尤其【qí】是在基层面临大量影像【xiàng】学内【nèi】容时，效率【lǜ】较低，准确率也容易受到影响。”黄震说，不少研究者将人工智能辅助医【yī】生判读运用到CT检查中【zhōng】，这【zhè】对于结核病的大规模筛查、快速诊断有【yǒu】重【chóng】要意【yì】义。

推动更【gèng】广【guǎng】泛运用新技术“在研究【jiū】者不断探索更加高效、精准的检【jiǎn】测【cè】诊断方法的同【tóng】时【shí】，疑似肺结核患【huàn】者依旧应该尽【jìn】量通过痰液标本进行【háng】筛查【chá】。细菌【jun1】学诊【zhěn】断方法仍是结核病诊断的‘金【jīn】标准’。”丁彩红表示，在条件允许的情况下，如果仅通过痰液标本检【jiǎn】测【cè】就能诊断【duàn】肺结核并尽早【zǎo】开【kāi】始【shǐ】治疗，无疑是好事【shì】。但痰【tán】中检测不到结核分【fèn】枝杆菌并不【bú】意【yì】味【wèi】着【zhe】不是肺结核，需要更进一【yī】步的【de】精准【zhǔn】检【jiǎn】测。

“尽管许多技术和研究仍处于早【zǎo】期【qī】开发或试验阶【jiē】段，但近【jìn】年来我们的诊断【duàn】能力【lì】一直在加【jiā】强【qiáng】，可用的高效【xiào】、精准诊断技术和工【gōng】具越来【lái】越多。”黄震介绍【shào】，在分子生物【wù】学【xué】技术【shù】领域【yù】，诊断能力的加强首先体【tǐ】现在标本扩展上。检测【cè】标本从【cóng】痰液标本逐渐拓展到【dào】非痰【tán】液标本，包括血液、尿液、粪便、支气【qì】管肺【fèi】泡灌洗液等，为患者提供了更多便利【lì】。

“对于【yú】咳【ké】痰条件不【bú】允许【xǔ】、无法自己产生高【gāo】质量痰【tán】液的人群，尤其是儿童、肺外结核【hé】患者、艾滋病患者等，基于非痰液标本的检测【cè】诊断技术飞速【sù】发【fā】展具有重要意义。”黄震【zhèn】说，通过早【zǎo】期诊断【duàn】、早【zǎo】期干预【yù】、早期治【zhì】疗，能够【gòu】有效避免此类人群患结核病后的快速【sù】重【chóng】症化。

结核病的早期确诊对于尽早治疗、减【jiǎn】少【shǎo】疾病传播至关重【chóng】要【yào】，但【dàn】目前结核病发现率和报告率仍【réng】有待进【jìn】一步【bù】提高。“我【wǒ】们要采取主动发现策略【luè】，对【duì】部分人群进行筛查【chá】检测。”首都医科大学【xué】附属北京胸科医院细菌免疫室主任逄【páng】宇介绍道，在诊断技术方面【miàn】，需进一步开【kāi】发具有【yǒu】更【gèng】高敏【mǐn】感度【dù】和【hé】特【tè】异性【xìng】的即时便携式检测方法和手【shǒu】段。

研【yán】究者们对【duì】舌【shé】拭子、深喉【hóu】检【jiǎn】测【cè】等【děng】便携式或自【zì】采样【yàng】标本检测技术也进行【háng】了初【chū】步探【tàn】索。“我【wǒ】们此前进行了【le】有关舌拭子和【hé】深喉检测的研究【jiū】，不少研究证明此类方法是有准确性和适用【yòng】性的。”逄宇说，通过规范流程采集到【dào】的样【yàng】本，可以作为一种较为可靠的痰【tán】液标本替代类型，在【zài】更精准优化采【cǎi】样流【liú】程、提高检测效能的未来，可助力大规模人群筛【shāi】查。

从目前来看【kàn】，一【yī】些较为前【qián】沿的检【jiǎn】测技术流程已经比【bǐ】较成熟。逄宇强调，新技【jì】术在【zài】临【lín】床应用【yòng】方面需要进一步规范和优化，通过多【duō】方【fāng】配合，推动更多医疗机构【gòu】运用新技术【shù】，惠【huì】及更多人。

2014年，世【shì】界卫生组织提出“终止结核【hé】病【bìng】战略”，并提出了2035年【nián】目标：与2015年相比，结核病发病率减少90%，死【sǐ】亡数减少95%，结核病的发【fā】病率降至10/10万以下。“要实现‘终止结核病战略’的目【mù】标，我们【men】需进一步努力。”黄【huáng】震说，探【tàn】索【suǒ】更多的有效检测诊断技术，让更多潜伏性结核【hé】感【gǎn】染者得到【dào】干【gàn】预，让更多【duō】结核【hé】病患者得【dé】到有效治疗，还有很多【duō】路要【yào】走。