pda培养基如何配置_PDA培养基的配制方法 环球观点

1、PDA培【péi】养基的配方【fāng】土豆【dòu】 200g葡萄糖 20g琼脂 15～20g水 1000mLpH值 自然PDA培【péi】养基的配【pèi】制称量【liàng】和熬煮 按【àn】培养基配方逐一称【chēng】取去皮土豆。

2、土豆切成小块【kuài】放入锅【guō】中，加水【shuǐ】1000ml，在【zài】加热器上加【jiā】热至沸腾，维持20-30min，用可【kě】用2层纱布趁热在量【liàng】杯上过【guò】滤【lǜ】，滤渣弃取。

3、滤液补充水分到1000ml。

(资料图)

4、加【jiā】热溶解【jiě】 把滤液放【fàng】入锅中，加入葡萄糖20g，琼脂15～20g(提前搞【gǎo】碎【suì】)，然【rán】后放在石棉网上，小火【huǒ】加热【rè】，并用【yòng】玻棒不断搅拌【bàn】，以防琼脂糊底【dǐ】或【huò】溢出，待【dài】琼脂完全溶解后，再补充【chōng】水分至所需量。

5、分装 按实训要求，将配制【zhì】的培【péi】养基分装入试【shì】管或500ml三角【jiǎo】瓶内。

6、分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。

7、分装量：固体培养基【jī】约【yuē】为试管高度的【de】1/5，灭菌【jun1】后制【zhì】成【chéng】斜面，分装入三角【jiǎo】瓶内【nèi】以不超过其容积的一半【bàn】为宜;半固体【tǐ】培养基以试管高【gāo】度的1/3为宜，灭菌【jun1】后垂【chuí】直待凝。

8、加棉塞 培养基分【fèn】装【zhuāng】完【wán】毕【bì】后，在试管口【kǒu】或三角烧【shāo】瓶口上塞【sāi】上【shàng】棉塞(或泡沫塑料塞或【huò】试管帽等)，以阻止外界微生物进【jìn】入培养基内造成污染，并保证【zhèng】有良好的通气【qì】性能。

9、包扎 加塞后，将全部【bù】试管用麻绳或橡皮筋捆好，再在【zài】棉塞外包一【yī】层【céng】牛【niú】皮纸，以【yǐ】防止灭菌【jun1】时冷凝【níng】水润湿【shī】棉塞【sāi】，其外再用一【yī】道线绳或橡皮筋扎好，用记【jì】号笔注明培养基名称、组别、配制日【rì】期【qī】。

10、棉塞【sāi】制作【zuò】说明棉塞的【de】作【zuò】用：一是防止【zhǐ】杂菌污染【rǎn】;二是可【kě】过滤空气，保证【zhèng】通气良好，并可减【jiǎn】缓培养基水分的蒸发【fā】，所以正【zhèng】确地制备棉塞是【shì】培养基制备中重要的一环。

11、正确的棉塞是【shì】形状【zhuàng】、大小，松紧应与试【shì】管口(或三角烧瓶)完全适合。

12、过紧则妨碍空气流通【tōng】，操【cāo】作不【bú】便;过松时，空气会毫无障【zhàng】碍地进入试管(或三角【jiǎo】烧【shāo】瓶)中，达不到【dào】灭菌【jun1】的【de】目的。

13、棉塞过小往往【wǎng】易掉【diào】进试【shì】管内，因【yīn】此棉【mián】塞质量【liàng】的优劣对实训的结【jié】果有很大的影响。

14、正确的【de】棉塞头较大，加塞时，应使棉【mián】塞长度的1/3留在试【shì】管口外，2/3在试【shì】管【guǎn】口【kǒu】内【nèi】。

15、目前，有条件的【de】实【shí】训室已使用坚【jiān】固的塑料【liào】试【shì】管帽、金属试管帽、硅胶泡沫塞替代棉塞，制作棉塞要选【xuǎn】纤维较【jiào】长的棉花，一【yī】般不选用脱脂棉【mián】。

16、因为它容易吸水变湿，造成污染，而且价格也贵。

17、PDA培养基【jī】配制注意【yì】事项培养基经灭菌后，必【bì】须【xū】放在37C温箱培养24h，无菌生【shēng】长【zhǎng】者方【fāng】可使用。

18、PDA培养基一般不需要调pH。

19、对于要调节pH的培养基，一般用pH试纸测定其pH。

20、如【rú】果培养基偏【piān】酸或偏碱时，可用lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶【róng】液进行调【diào】节。

21、调节时应逐滴加入NaOH或【huò】HCl溶液，防【fáng】止【zhǐ】局部【bù】过【guò】酸或过碱【jiǎn】破坏培养基成分。

22、培养基在使用时也可以做成不含琼脂的液【yè】体【tǐ】培养【yǎng】基，用【yòng】于菌类的【de】震荡培【péi】养【yǎng】。

23、培【péi】养基也可以加入氯霉素或土【tǔ】霉素【sù】，加入量为0.2g/L培【péi】养基，主要【yào】是为了抑【yì】制细【xì】菌的【de】生长，减少【shǎo】干扰性。

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